Detección de anticuerpos mediante ELISA (ELISA competitivo)
Los pocillos de reactivo de la microplaca, recubiertos con antígeno, se incuban con las muestras de los pacientes diluidas. Si la muestra contiene anticuerpos específicos dirigidos contra el antígeno, estos se unen a los pocillos recubiertos con el antígeno e inhiben la unión de una molécula artificial marcada con biotina, que se añade posteriormente al pocillo de reactivo. A continuación, se añade avidina marcada con peroxidasa, que se une a las moléculas marcadas con biotina.
En el tercer paso de incubación, la peroxidasa y su sustrato, la tetrametilbencidina (TMB), catalizan una reacción de color. La intensidad de la coloración resultante es inversamente proporcional a la concentración de anticuerpos presente en la muestra del paciente dentro del intervalo de medición. En los ensayos cuantitativos, puede convertirse en una concentración mediante una curva de calibración.